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BsaI尊龙凯时GMP级内切酶

发布时间:2025-03-25   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时的活性定义1:活性单位(U)是指在50μl反应体系中,于37℃下经过1小时能够完全酶切1µg pPIC9K(Dcm-)所需的酶量。通过SDS-PAGE凝胶电泳检测蛋白的纯度,其纯度不低于95%。

BsaI尊龙凯时GMP级内切酶

尊龙凯时的星号活性:在37℃、50μl CutBuffer F和GMP Grade反应体系中,将20U BsaI与1µg pPIC9K(Dcm-)共同孵育1小时,未检测到其他核酸酶污染或因星号活性引起的底物非特异性降解。需注意,延长酶切时间可能导致星号活性的出现。

尊龙凯时非特异性内切酶活性:在37℃下,将20U BsaI与1µg超螺旋质粒DNA在50μl CutBuffer F和GMP Grade反应体系中孵育4小时后,使用琼脂糖凝胶电泳检测,发现少于20%的质粒DNA转变为缺刻或线性状态。

尊龙凯时的DNase活性测试:在37℃下,将20U BsaI与15ng双链DNA片段共同孵育16小时,在20μl CutBuffer F和GMP Grade反应体系中检测,结果显示双链DNA片段未发生变化。

尊龙凯时的RNase活性:在37℃下,将20U BsaI与500ng RNA在10μl CutBuffer F和GMP Grade反应体系中孵育1小时,检测结果表明,超过90%的RNA保持完整。

尊龙凯时的同裂酶Eco31I、Bso31I、BspTNI识别位点为:GGTCTC (1/5) 5' GGTCTC(N)₁ ↓ 3' 3' CCAGAG(N)₅ ↑ 5'。BsaI(GMP Grade)由重组大肠杆菌表达获得,能够在15分钟到1小时内精确完成目标DNAenzyme切割。

本产品采用符合GMP标准的生产和质量管理体系,确保生产过程和原辅料全程可追溯。整个生产过程中不使用抗生素和任何动物来源的原料与辅料,严格控制宿主蛋白、外源DNA、非特异性内切酶、DNase、RNase等工艺相关杂质,以及微生物限度和细菌内毒素等。本产品符合疫苗与药物生产领域的原辅料要求。

失活条件为:80℃孵育20分钟。针对被CpG甲基化的DNA,酶切可能受到阻碍;对被Dcm甲基化的DNA,酶切也可能会受到影响。